煙草花葉病毒檢測(cè)的作用和技術(shù)特征

更新時(shí)間：2023-03-26

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　　煙草花葉病毒檢測(cè)可在多種植物上越冬，也可附著在番茄種子上、土壤中的病殘?bào)w上越冬，田間越冬寄主殘?bào)w、烤曬后的煙葉、煙絲均可成為該病的初侵染源。主要通過汁液接觸傳染，只要寄主有傷口，即可侵入。黃瓜花葉病毒主要由蚜蟲傳染，此外用汁液摩擦接種也可傳染。冬季病毒多在宿根雜草上越冬，春季蚜蟲遷飛傳毒，引致發(fā)病。番茄病毒病的發(fā)生與環(huán)境條件關(guān)系密切，一般高溫干旱天氣利于病害發(fā)生。此外，施用過量的氮肥，植株組織生長柔嫩或土壤瘠薄、板結(jié)、黏重以及排水不良發(fā)病重。番茄病毒的毒源種類在一年里往往有周期性的變化，春夏兩季煙草花葉病毒比例較大，而秋季黃瓜花葉病毒為主。因此，生產(chǎn)上防治時(shí)應(yīng)針對(duì)病毒的來源，采取相應(yīng)的措施，才能收到較滿意的效果。

　　煙草花葉病毒檢測(cè)樣品的收集、處理及保存方法：

　　1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

　　3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃。

　　煙草花葉病毒檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法，屬于植物病毒檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的煙草花葉病毒定量檢測(cè)試劑盒包括如下分裝試劑和酶標(biāo)板：所述酶標(biāo)板為煙草花葉病毒抗體預(yù)包被酶標(biāo)板；所述分裝試劑為：樣品稀釋液，為磷酸鹽緩沖液；洗滌液，含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1～0.5％的Tween?20的磷酸鹽緩沖液；反應(yīng)終止液，濃度為1.8～2.2mol/L的H2SO4溶液；酶標(biāo)抗體工作液，辣根過氧化物酶標(biāo)記的濃度為2μg/ml的特異性鼠抗煙草花葉病毒單克隆抗體；顯色劑；煙草花葉病毒標(biāo)準(zhǔn)品。本發(fā)明的試劑盒能夠?qū)崿F(xiàn)煙草花葉病毒的定量檢測(cè)，且快速、準(zhǔn)確度高、靈敏度高。